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| 文章来源：纤维技术 点击数： 更新时间：2008-4-17 【字体：小 大】 |
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摘要 采用酶解、去壁．低渗法对我国苎麻品种黑皮蔸的体细胞染色体数目和核型进行分析。并对苎麻染色体基数进行了探讨。结果表明，苎麻黑皮蔸俸细胞染色体数是28条，核型公式2n--28=28st(2SAT)全为不站称的染色体．臂比值与其染色体数相等。染色体长度比大于2：I。属于48类核型。
关键词 染色体；桉型；苎麻；纤维作物
苎麻[Boehmeria nivea(Linn．)Gaudich．]，荨麻科(Urticaceae)苎麻属(Boehmeria Jacq．)多年生宿根性草本植物，是优良的韧皮纤维作物。其纤维质地轻、细长、坚韧、有丝光、吸湿散热快、有绝缘性，具有良好的可纺性能与服用性能，是优良的纺织原料。对苎麻栽培、育种、生理生化、形态解剖以及加工等方面研究较多，而对苎麻细胞学基础理论研究极少[l].笔者对苎麻的染色体数目及结构特征进行了研究，旨在为苎麻细胞学分类、遗传变异、新品种选育以及分子水平的研究提供细胞学方面的依据.
1材料和方法
1．1 材料
1．1．1 苎麻
为贵州优质地方品种黑皮蔸。保存于国家种质长沙苎麻圃。取嫩梢扦插萌发幼根，或种子诱发幼根(根长lcm时)的根尖。
1．1．2酶制荆
果胶酶[pectinase，来源子黑曲霉(aspergiltus niger van Tieghem)]，酶活260 U／g．德国产(E．C 3．2．1．15)；纤维素酶[cellulase，。来源予绿色木霉(trichoderma viridepers．)]，酶活>15000 U／g，上海产(E.c3.2．1．4)o
1．2 方法
于O8：00～09：00或14：30前后截取根尖，依次作如下处理.
①前处理设3个处理：a．2 mmol／L的8一羟基喹啉溶液中l8℃处理1～2 h；b．0--4℃下处理18-24 h：c．50 m9／L的秋水仙碱浓度溶液中，26℃处理2 h左右。蒸馏水洗净.．前处理使细胞染色体有丝分裂同步于中期相，便于染色体的观察。
②前低渗75 mol／L的KCl浸泡l5 min。
③酶解纤维素酶和果胶酶溶解细胞壁，使染色体易于散开。设2个处理：口．25 m9／mL纤维素酶加25 m9／mL果胶酶混合液，18"--'28℃条件下酶解1-'--3 h：b，．40 m9／mL纤维素酶加10 m9／mL果胶酶的混合液．37℃温浴酶解7～15 min0酶解后，用蒸馏水洗净.
④后低渗 l8""-28℃蒸馏水中浸泡20 min。
⑤固定放入卡诺固定液中固定，待制片。
⑥火焰制片 取l唧左右的根尖分生组织置于载玻片上．加少量卡诺固定液；用镊柄充分捣碎；滴少量固定液；在酒精灯上火焰干燥.
⑦染色 用磷酸缓冲液(pH 6．8)配制l0：l的Giemsa染色液，染色l～2 h，蒸馏水冲洗，晾干.
⑧镜检和显微照相镜检细胞有丝分裂中期相。选择分散较好，有足够染色体数目的细胞分裂相进行显微摄影和分析。
核型分析取5个细胞的平均值．染色体数目计算按李懋学的方法[3,4]。命名按Leven方法[5]．核型按Stebbins分类标准[6]。
2结果与分析
2．1 苎麻黑皮蔸染色体数目及核型特点
细胞观察发现．黑皮蔸染色体为28条的423个。占94％。这与Kraus T．于l931年报道的白叶苎麻染色体基数为l4，2n=28是一致的。苎麻染色体很小，其短臂短而小，长臂较长，且长臂的2条单体分开．呈金鱼状.
核型主要特征列入表l、表20相对长度变化在4．54％"--9．48％间，第3、l3对染色体具随体o14对染色体的臂比值大于3．1。全为亚端着丝点类型，不对称核型程度很高。臂指数(NF值)与其染色体的条数相等，为280染色体长度比为2．09，属于48核型。核型公式为2n--2x=28=28st(2SAT)o
2．2 黑皮蔸染色体棱型分析的影响因素
2．2．1 取材及处理时间
观察了扦插嫩梢50个植株的450个细胞和种子苗的100个根尖近200个细胞．发现水插嫩梢毒根根尖的观察效果比种子根尖的好，种子根尖太小。后续处理容易丢失，制片极不方便。取材时间以O8：00～09：O0为宜．此时选取的材料分裂相较多。比较容易找到合适的中期分裂相.
2．2．2预处理
预处理以0～4℃处理18～20 h为宜0 8一羟基喹咻、秋水仙素处理效果均不及0～4℃低温处理分裂相多．染色体的形态好0 8一羟基喹啉或秋水仙素处理其他作物效果较好。但是对苎麻这种染色体比较小的作物而言。用8一羟基喹啉或秋水仙素处理后．使得苎麻染色体缩得更短。所以，效果不如在0.--4"C低温处理的好。
2．2．3 酶解
40mg／mL纤维素酶+10 mg／mL果胶酶37℃温浴10min的酶解效果，优于25 mg／mL果胶酶+25mg／mL纤维素酶混合酶液酶解l～3 h，且所需时间短，所用酶液量少。但酶的浓度、酶解时间、温度一定要掌握合适。否则难以得到理想分裂相a
3结论与讨论
3．1 结论
3．1．1 上午8：00～9：00取材有助于苎麻染色体观察；在O～4℃预处理l8～24 h，4％纤维素酶+1％果胶酶37℃温浴10 min处理效果好。能得到分散比较均匀的染色体中期相。
3．1．2 苎麻体细胞染色体为28条，核型公式2n=28--28st(2sAT)．染色体属48不对称类型。
3．2 讨论
3．2．l 关于苎麻染色体数目、随体和B染色体
在观察的450个细胞中j有27个细胞的染色体数目为30条．占观察数的6％a多出的2条染色体比较小。呈点状。有时见到有随体与次缢痕相连．这2条染色体是否为脱落的随体还是8染色体。有待进一步研究口由于苎麻染色体的形态、大小相差无几，着丝点位置亦相同，故很难确定随体位于哪一对染色体上。曾有报道说，苎麻有l对B染色体。但是否每株苎麻都有B染色体。同一株苎麻的每个细胞都有B染色体?总之，B染色体对苎麻植株自身的生长、育性的影响和遗传表现中的作用尚不清楚。有待进一步的研究。
3．2．2 苎麻染色体基数的探讨
臧巩固提出。苎麻属染色体的基数可能是7[7]。张波在苎麻野生近缘种的细胞学观察中发现。大叶苎麻组群Sect．Daretia中存在染色体倍性不同的种。具无融合生殖特性的种。其染色体倍性较高，2n--42或2n----56；有性生殖的种．染色体数均为2n--28tsi。杨瑞芳等对7份苎麻野生资源的核型及Giemsa C一带带型及苎麻染色体基数进行研究。结果表明．2份野生资源有染色体数目为56和42，其余5份材料均为28，核型属48和4A不对称类型[9].因此．苎麻的染色体基数是7还是l4，有待进一步研究。通过对苎麻品种黑皮蔸染色体核型分析文章的学习，你一定掌握了苎麻品种黑皮蔸染色体核型分析的精华部分，虽然通过对 纤维技术知识的学习，你可能还不能够掌握全部的纤维方面的知识。但是我相信这篇文章《苎麻品种黑皮蔸染色体核型分析》一定给你带来了很大的激励，希望你在 纤维技术学习方面越走越远，若是喜欢本网站内容，请记住本站地址http://www.nimimi.com，本篇文章的题目是：苎麻品种黑皮蔸染色体核型分析。
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